In questo lavoro viene mostrato che gli ExSpeU1s hanno un’attività più ampia rispetto all’azione già dimostrata sull’esone 12, in quanto correggono mutazioni di splicing anche nell’esone 5. Per studiare in dettaglio i meccanismi molecolari, i ricercatori hanno caratterizzato la composizione delle particelle ExSpeU1s. Hanno così visto che ExSpeU1RNA è assemblato in complessi RNA-proteina con caratteristiche simili al U1snRNPs naturale. Inoltre hanno identificato proteine associate che sono strettamente necessarie per recuperare lo splicing aberrante. Infine hanno esplorato il potenziale effetto terapeutico di ExSpeU1 su di un nuovo modello cellulare (fornito di minigeni competenti per lo splicing ) e hanno visto che ExSpe U1 recupera la sintesi della proteina CFTR mutata per effetto di mutazioni splicing. Gli ExSpe U1 rappresentano un’interessante strategia terapeutica basata sull’RNA, utile per la correzione di mutazioni di splicing distribuite lungo il gene CFTR.
The researchers show that ExSpeU1s have a broaderactivity on CFTR gene as they correct splicing mutations also in exon 5. To investigate in detail the molecular mechanisms, they havecharacterized the composition of ExSpeU1s particles. The results indicate that ExSpeU1RNA isassembledi nto RNA-proteincomplexes with similarcharacteristic to endogenous U1snRNPs. In addition, throughmutagenesis of RNA domainsthatform the particle, theyidentifiedassociatedproteinsthat are strictlyrequired for theirsplicing rescue activity. Lastly, to explore the potentialtherapeuticeffect of ExSpeU1 theyevaluatedtheireffect on CFTR protein. In a novelcellular model based on splicingcompetentminigeneswe show thatExSpe U1 rescuessplicing and proteinfunction. ExSpe U1s represent an interesting RNA-basedtherapeuticstrategy to correct CFTR splicingmutationsdistributedalong the CFTR gene.
