Il metodo siRNA permette di spegnere selettivamente un gene (e la sintesi della relativa proteina) per volta, valutandone gli effetti sulla maturazione di CFTR mutata. E’ stato valutato in questo modo il ruolo di 6650 geni umani (e relative proteine); in particolare è stato studiato l’effetto della soppressione di una di queste proteine (RNF5), utilizzando modelli animali di FC incrociati con animali in cui il gene della proteina RNF5 era stato spento. RNF è risultata migliorare su modello animale il malassorbimento tipico di FC. Altre tre proteine (MLLT6, UBXD1 e FAU) sono risultate possibili di modulazione, con effetto di recupero di CFTR-DF508 mutata. Queste proteine, importanti nella maturazione e degradazione della proteina mutata, possono rappresentare nuovi bersagli terapeutici.
In vivo studies demonstrated that suppression of RNF5 a protein identified by siRNA significantly ameliorates the intestinal malabsorption that is peculiar of CF, supporting the hypothesis that RNF5 could be the target of a novel drug therapy for CF. In addition, the genome-wide screening highlighted a list of proteins whose silencing caused a significant rescue of F508del-CFTR activity in CFBE41o- cells. Among the most interesting targets, we found MLLT6, UBXD1 and FAU proteins. In particular, MLLT6, also known as Af17, is a transcription factor that upregulates the transcription of the epithelial sodium channel (ENaC) genes. Further studies are needed to characterize interaction and function of these proteins in CFTR maturation/degradation. The identification of new proteins and the unraveling of the cellular processes, whose modulation leads to an increased F508del rescue, is important since it will help in identifying novel targets for treatments with improved efficacy and selectivity.
