La più frequente mutazione F508del causa un blocco nella maturazione della proteina CFTR. Molecole chiamate correttori esercitano un’azione di recupero, agendo direttamente su CFTR oppure modulando altre proteine che interferiscono con la sua maturazione. Una delle più interessanti fra queste proteine è la ligasi RNF5: si è visto che inibendo la ligasi RNF5 si aumenta il recupero di CFTR. Nel precedente progetto FFC i ricercatori hanno identificato un composto chiamato 2A2 in grado di inibire l’attività di RNF5 e migliorare così la maturazione di F508del in cellule bronchiali umane immortalizzate. Ora intendono ottimizzare questa molecola e trovarne altre analoghe, valutandone poi l’efficacia attraverso metodi elettrofisiologici, in epiteli derivati da pazienti con fibrosi cistica (con una o due copie di F508del o altre mutazioni che causano un difetto simile). RNF5 può diventare un nuovo bersaglio farmacologico ed entrare a far parte della combinazione di farmaci che si prevedono necessari per massimizzare il recupero di F508del.
The most frequent mutation in cystic fibrosis, F508del, causes the arrest of the maturation of CFTR protein. Correctors are able to rescue F508del-CFTR acting directly on CFTR or by modulating other proteins leading to beneficial effects on CFTR maturation. Among these proteins, one of the most promising is the ligase RNF5, whose inhibition is crucial for CFTR rescuing. By using a computational approach, in their previous FFC project identified one compound, called 2A2 that efficiently inhibits RNF5 ligase activity in immortalized human bronchial cells. The aim of this proposal is now to identify optimized RNF5 inhibitors and to evaluate their efficacy in epithelia from CF patients. Improved RNF5 inhibitors will be developed by screening of commercially available analogs and by synthesizing novel analogs; their efficacy on rescuing mutant CFTR will be assessed by electrophysiological techniques on bronchial epithelial derived from patients with one/two copies of F508del or other mutations with trafficking defect. Optimized RNF5 inhibitors may become part of combined drugs required to maximize F508del-CFTR rescue.
