Il progetto si propone di studiare con una metodica sofisticata (raggi -X a basso angolo) la struttura della proteina CFTR. Questa metodica permette di avere informazioni dettagliate sulle parti che compongono la proteina e sul loro funzionamento, in condizioni simili a quelle presenti nel corpo umano. La proteina CFTR normale e quella mutata saranno esposte all’azione dei farmaci chiamati “potenziatori”, allo scopo di definire il loro meccanismo d’azione ancora sconosciuto. I farmaci potenziatori, alcuni già in sperimentazione clinica ed altri in corso di avanzato sviluppo preclinico, servono ad aumentare l’attività della proteina CFTR difettosa ma arrivata alla sua giusta sede di azione, la membrana cellulare apicale.
The objective of this project is to describe the molecular features and the interactions that occur between the intracellular domains of the CFTR, the two nucleotide binding domains (NBD1 and NBD2) and the regulatory domain. We will use recombinant polypeptides in solution to obtain structural data using small−angle X−ray scattering, electron microscopy and atomic force microscopy. Furthermore, we will characterize the properties of these polypeptides with a series of biochemical and biophysical experiments, to better understand the structural data. The final goal will be to obtain structural an physical−chemical data, allowing to clarify the activation and gating mechanism of the CFTR Cl- channel in normal conditions and in the presence of CF related mutations, to definitely identify the molecular nature of the pathological defects and provide a good basis to develop more efficient pharmacological therapy.
