Progetto di continuazione
Una delle più importanti linee di difesa del polmone contro Ps. aeruginosa sono i macrofagi polmonari, una specie di cellule derivate in parte da globuli bianchi del sangue (monociti). Risultati preliminari ottenuti sui macrofagi polmonari CF sembrerebbero indicare un difetto totale nella capacità di tali cellule di eliminare Pseudomonas aeruginosa. L’obiettivo di questo progetto è di determinare se mutazioni di CFTR influenzino la capacità battericida dei macrofagi polmonari umani. Inoltre, il progetto si propone di delucidare i meccanismi coinvolti nella eliminazione di Ps. aeruginosa nei macrofagi derivati dai monociti e nei macrofagi polmonari umani e di caratterizzare l’espressione e la localizzazione della proteina CFTR in queste cellule. Infine sarà verificata l’infezione dei macrofagi alveolari umani da parte di Ps. aeruginosa attraverso l’analisi della presenza del batterio nei macrofagi presenti negli espettorati dei pazienti CF.
With the aim to define the role of CFTR mutations in the bactericidal activity of human macrophages, we have previously demonstrated that human monocyte derived macrophages express CFTR mRNA and that CFTR protein is mainly localized at the plasma membranes of normal cells. However, analysis of bactericidal activity revealed that either CF and non-CF macrophages killed P. aeruginosa in vitro, although the former were less efficient at later stage of infection. At variance, preliminary results from bacterial killing analysis of CF lung macrophages indicated impairment in the bactericidal activity against P. aeruginosa. Thus the goal of this proposal is to determine whether mutations in CFTR affect bactericidal activity of human lung macrophages. Moreover the mechanisms utilized by monocyte derived- and lung macrophages to eliminate intracellular P. aeruginosa, as well as CFTR expression and localization in lung macrophages will be analysed. Finally the relevance of P. aeruginosa infection of alveolar macrophages will be assessed ex vivo.
