Sono state prodotte formulazioni liposomali (Apoptotic Body like Liposomes=ABL) coniugate con PA (Acido Fosfatidico) e PS (Fosfafitidilserina). Tali formulazioni sono state preliminarmente valutate in macrofagi umani, infettati o no in vitro con Bacillo di Calmette-Guerin (BCG) o P. aeruginosa (Pa). L’efficacia di queste formulazioni è stata successivamente analizzata su cellule di lavaggio broncoalveolare (BAL) provenienti da pazienti con diverse infezioni batteriche polmonari e su macrofagi e neutrofili provenienti da pazienti con FC ed infettati in vitro con Pa. La risposta infiammatoria è stata valutata, infine, su cellule dendritiche (speciali globuli bianchi specializzati nella cattura di agenti estranei) tramite citofluorimetria. I principali risultati mostrano che i) ABL che veicolano PA inducono un fenotipo tollerogenico nelle cellule dendritiche ii) ABL che veicolano PA aumentano in modo significativo la risposta microbicida in macrofagi di pazienti FC e in cellule di BAL di pazienti con diverse infezioni polmonari batteriche e iii) ABL che veicolano PA, in associazione con gentamicina e ampicillina, esercitano un effetto battericida diretto contro Pa che risulta sinergico rispetto ai trattamenti singoli. La prospettiva è di realizzare un nuovo strumento immunoterapeutico, potenzialmente utilizzabile per via aerosolica, con azione antimicrobica e antiinfiammatoria.
The investigators produced asymmetric apoptotic body like liposomes (ABL) characterized by the presence of phosphatidylserine (PS), at the outer leaflet, and carrying phosphatidic acid (PA), at the inner leaflet of liposome membrane. ABL were preliminarily tested on differentiated THP-1 cells (used a s a model of human macrophages) infected or not with Bacille Calmette-Guerin (BCG) or P. aeruginosa (Pa).Th effect of the different liposome formulations on antibacterial response was also studied ex vivo on Bronchoalveolar lavage (BAL) cells, from patients with different pulmonary infections, and on monocyte derived macrophages and neutrophils, from CF patients, in vitro infected with Pa. The effect of ABL on inflammatory response was also evaluated on Dendritic cells by flow cytometry. The main results shew that i) ABL carrying PA induce a tolerogenic phenotype in dendritic cells, ii) ABL carrying PA or PI(5)P significantly increase bacteriocidal response in CF macrophages and in bronchoalveolar lavage (BAL) cells from patients with pulmonary infections by a wide range of bacterial pathogens, and iii) ABL carrying PA exert a synergistic direct bacteriocidal effect against P. aeruginosa when used in association with gentamicin plus ampicillin.The purpose is the generation of a novel antimicrobial and antiinflammatory tool to be used as possible aerosol treatment.
