Progetto di continuazione
Quando un gene viene espresso, il primo passo consiste nella produzione di una molecola di precursore di RNA che è identica a quella del DNA che funge da stampo. Questa molecola contiene l’informazione necessaria per dirigere la sintesi di una proteina, che è il prodotto finale di un gene. Tuttavia, l’informazione che riguarda la proteina è contenuta solo in un piccolo segmento della molecola di RNA, mentre i più larghi pezzi tra questi segmenti devono essere rimossi. Questo avviene grazie ad un processo conosciuto come “splicing” ed una serie di complessi proteici identificabili come il “macchinario dello splicing” sono coinvolti. Inoltre in taluni casi e’ possibile selezionare alternativamente splicing differenti o alternativi, generando quindi proteine diverse a partire dallo stesso gene. In questo studio ci si propone di identificare opportuni bersagli terapeutici per correggere difetti genetici che causano la malattia CF e di analizzare gli splicing alternativi di altri geni recentemente scoperti, la cui espressione potrebbe essere implicata nella malattia (come il TMEM16a, un nuovo canale del cloro). In particolare saranno esplorate nuove strategie terapeutiche che utilizzano oligonucleotidi antisenso per correggere i difetti di splicing. Noi speriamo che nel futuro sarà possibile estendere questa strategia terapeutica per correggere difetti di splicing in persone affette.
When a gene is expressed, the first step is the production of a precursor RNA molecule that is identical to the one of the DNA strands. This molecule contains the information necessary to direct the synthesis of a protein, the ultimate product of a gene. However, this information is distributed on a small segment of the RNA molecule, and the large bits between the segments have to be removed. This is done in the process known as splicing and the protein complexthat do this jib is defined as the “splicing machinery”. This machinery, can also produce through alternative splicing, different protein isoforms from the same gene. In CFTR gene, changes in the DNA may in turn affect the signals in the RNA that are required for splicing. This means that splicing either does not happen, or proceed incorrectly which means that the protein is not produced and disease results.
This proposal will address the importance of the splicing machinery in two CF-related genes. We intend to study the splicing machinery to test novel strategies for correction of individual splicing defects in CFTR gene and to explore the contribution of other recently identified alternatively spliced genes in the disease (TMEM16A gene). This study intends to identify suitable targets for oligonucleotidemediated splicing correction. We hope that in the future it will be possible to extend the therapeutic strategy to correct aberrant splicing events in affected individuals.
